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蛋白質純化紫外線吸收法中紫外線強度檢測

發布時間:2022-9-1 09:48    發布者:鳳凰火

蛋白質純化是指將一種或多種蛋白質從復雜混合物中分離出來的一系列過程。蛋白質的分離純化廣泛應用于生化研究,是一項重要的生物研究技術。一個典型的真核細胞可以包含成千上萬種不同的蛋白質,為了研究某種蛋白質,必須首先從其他蛋白質和非蛋白質分子中純化該蛋白質。
蛋白質的純化要用不同蛋白質間內在差異和相似性去除非蛋白質中的污染,用蛋白質的差異從其他蛋白質中純化出需要的蛋白質。因為每種蛋白質的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解性和生物活性都是不同的,利用這些差異可以從混合物中提取如結腸細菌的裂縫。
在蛋白質和抗體的純化工作中,準確地進行定量是很重要的,通過測定蛋白質的紫外吸收情況來測量是目前較為快速方便的一種方法。
蛋白質所具有的紫外吸收特性來自于含有共軛雙鍵的色氨酸、酪氨酸等芳香族氨基酸分子,在280納米附近有最大的光吸收峰。因為大多數蛋白質含有酪氨酸和色氨酸殘基,在280納米波長下測定蛋白質的吸光度是分析溶液中蛋白質含量的最快和最簡單的方法。
紫外吸收法測定蛋白質含量的優點是快速、簡單、不消耗樣品、低濃度鹽類不干擾。但是,這種方法存在一定的缺點,例如在確定那些與標準蛋白質中酪氨酸含量和鉻含量不同的蛋白質時會有一定的誤差和干擾。
不同的蛋白質和核酸對紫外線的吸收是不同的。即使經過校正,測量結果仍有一定誤差,但可以作為初步定量的依據。測量過程中也需要對紫外線強度進行監測,工采網推薦使用紫外光電探測器和紫外線傳感器
德國SGLUX 紫外光電探測器 - TOCON_ABC10,基于碳化硅的寬頻紫外光電探測器放于TO5 外殼中,帶有衰減器,高度現代化的電子元件和帶有紫外玻璃窗的密封金屬外殼可消除封裝內寄生電阻路徑導致的噪聲或電磁干擾。
韓國GENICOM 可見光傳感器/紫外線傳感器 - GVBL--T12GD,具有良好的溫度穩定性,可以完全屏蔽UVC和UVB波段的紫外線。由于該紫外線-可見光傳感器在太陽光下會有輸出,故使用時應注意避免有環境光的干擾。

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